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 小分子有多少种分析方法？

    小分子是指什么？通常有多少种分析方法呢？今天就来简单解释一下。

    小分子指低分子量化合物（通常小于900道尔顿）。常见小分子包括氨基酸、脂质、糖类、脂肪酸、生物碱等。

    现有多种分离小分子的方法，包括高效液相色谱(HPLC)、液相色谱(LC)、气相色谱(GC)、薄层色谱(TLC)和毛细管电泳(CE)。此外，还可通过磁共振波谱(NMR)或质谱(MS)等方法鉴定小分子。最近几年液相色谱-质谱联用(LC-MS)成为重要的小分子鉴定技术。

 

    高效液相色谱HPLC、UHPLC或LC-MS法小分子分析能否获得理想的结果，取决于是否选择了最适宜的固定相和流动相条件。分析物化学特性是选择最适宜的柱化学修饰的关键因素。而速度、样品基质和化合物含量等其他因素则决定了最适宜的固定相基质材料。


小分子HPLC分析

    小分子HPLC分析通常采用反相分离方式。极性化合物分离可选用亲水作用色谱(HILIC)和正相色谱，前者效果更佳。离子化合物分离可选用离子交换分离方法，有机阴离子或阳离子还可选用离子色谱法。

    HPLC色谱柱可填充全多孔硅胶颗粒、表面多孔硅胶颗粒、聚合物颗粒，或以整体型硅胶棒作为固定相，也可使用氧化铝、氧化锆颗粒和碳颗粒。分离小分子时，固定相材料孔径范围通常为60Å-160Å。HPLC固定相粒径范围通常为3µm至5µm，UHPLC粒径通常为2µm或更小。固定相可附加不同的柱选择性（修饰）。C18烷基链是反相(RP)色谱法最常用的柱化学修饰。但通过C30、C8、苯基、五氟苯基等其他修饰，大量极性更强的修饰以及具有离子交换或手性的修饰，几乎可分离所有溶于液体的化合物。RP-HPLC的流动相通常含有水相缓冲液或水和水溶性有机溶剂，如乙腈或甲醇。


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