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 高效液相色谱HPLC故障问题排查(八)

高效液相色谱HPLC故障问题排查之八

问题:宽峰

可能的原因:

1、流动相组分发生变化。

2、流动相流速太低。

3、漏液(特别是在色谱柱与检测器之间)。

4、检测器设置不正确。

5、柱外效应:
a.色谱柱过载
b.检测器反应时间或流通池体积过大。
c.色谱柱与检测器之间的管线太长或管线内径太大。
d.记录器响应时间太长。

6、缓冲液浓度太低。

7、保护柱污染/失效。

8、色谱柱污染/失效。

9、色谱柱入口空洞。

10、所出现的峰代表两种或多种解析不良的化合物。

11、柱温过低。

排查方法:

1、重新制备新的流动相。

2、调节流速。

3、检查系统是否有松动的配件。检查泵是否有漏液,是否有盐析出和异常噪音。必要时更换泵密封件。

4、调节设置值。

5、a.注入较小的体积(例如10 μL,而不是 100μL)或以1:10或1:100的比例稀释样品。
b.减少响应时间或使用更小的流通池。
c.在可行的情况下,使用内径为0.007~0.010“的短管。
d.减少响应时间。

6、增加浓度。

7、更换保护柱。

8、换成同类型的新色谱柱。如果新柱未提供窄峰,则冲刷旧柱,然后重新测试。

9、更换色谱柱,或打开入口端填补空洞。

10、更换色谱柱类型,以改善分离效果。

11、提高柱温。除非色谱柱制造商说明可采用更高的温度,否则温度不宜超过75℃。

宽峰

网址:www.xinfengrepentu.com

电话:400-800-5586

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