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 高效液相色谱HPLC故障问题排查（四）

高效液相色谱HPLC故障问题排查之四

问题：裂峰

可能的原因：

1、保护柱或分析柱入口污染。

2、筛板部分堵塞。

3、色谱柱入口处有小（不规则）空洞。

4、样品溶剂与流动相不相容。

排查方法：

1、取下保护柱（如果有）进行分析。必要时更换保护柱。如果分析柱阻塞，可反洗。如果问题仍然存在，则色谱柱可能被强保留污染物堵塞。建议使用适当的再生程序。如果问题仍然存在，则入口处的筛板可能（部分）堵塞。更换筛板或更换色谱柱。

2、更换筛板。

3、用具有相同键合相功能的薄壳型颗粒重新填充色谱柱顶部。继续沿反向流动方向使用色谱柱。

4、调节溶剂。尽可能在流动相中注入样品。

裂峰

问题：初次和后期进样时出现峰拖尾

可能的原因：

1、样品与活性位点发生反应。

2、流动相pH值错误。

3、色谱柱类型错误。

4、色谱柱入口处有小（不规则）空洞。

5、进样溶剂错误。

排查方法：

1、首先用色谱柱测试混标检查色谱柱性能。如果测试混标的检查结果良好，则添加离子对试剂或类似的碱或酸改性剂。

2、调节pH值。对于碱性化合物，低pH值更有利于得到对称峰。

3、试用其他色谱柱类型（例如碱性化合物去活色谱柱）。

4、详见裂峰部分。

5、当样品注入比流动相更强的溶剂时，会出现峰拖尾。将样品溶解于流动相中。


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