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 细胞计数之细胞活力测定

细胞计数之细胞活力测定

DNA合成：监测细胞中的活性DNA合成，是部分细胞增殖测定的基础条件。通过掺入修饰的核苷（例如可借助抗体检测到的放射性3H-胸苷或非放射性溴脱氧尿苷（BrdU）），可测定DNA复制情况。

代谢活动：测定代谢活性的热量测定适于分析细胞增殖、细胞活力和细胞毒性。仅在代谢活跃的细胞中，四唑盐（如MTT、XTT和WST-1）才会还原为有色的甲臜化合物。ATP的存在也是代谢活性的指标。在萤火虫萤光素酶报告基因测定中，分裂细胞产生的ATP可氧化D-萤光素，从而产生可读取的生物荧光。

染色：台盼蓝染色常用于活细胞计数。该方法基于以下原理：活细胞不会吸收染料，而死细胞会吸收染料并在显微镜下呈蓝色。

荧光细胞活力测定：5(6)-羧基荧光素二乙酸酯N-琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记是测量细胞群中的细胞分裂代数的普遍选择。另一种可透过膜的染料Calcein-AM本身不发荧光，但在被活细胞水解后会发强烈的绿色荧光。而碘化丙锭(PI)核染料仅可通过穿过受损细胞的受损膜到达细胞核。由于钙黄绿素和PI-DNA均可被490 nm的光激发，因此可通过单激发荧光显微镜同时监测活细胞和死细胞。


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