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 间充质干细胞应该如何分离

间充质干细胞（MSC）具有多谱系分化的能力，产生多种间充质表型，例如成骨细胞（骨）、脂肪细胞（脂肪）和软骨细胞（软骨）。

目前已可从多种组织中分离出间充质干细胞，包括人骨髓、脂肪组织、脐带和牙髓。以下是一个简单的通用实验方案，可用于从各种组织来源获得MSC。

注意：MSC种群因供体而异，可能需要进一步优化。

取适量在无菌条件下收集的新鲜组织抽吸物。

用70 mm滤网（CLS431751）过滤细胞悬液以去除任何细胞团块。

在台式离心机中将细胞以500g沉淀5分钟。

重悬细胞，并用台盼蓝(T8154)排除法确定细胞的产量和活力。

在10 ml完全MSC培养基 (SCM015 ｏｒ SCM045)中以25 × 106细胞/ml的密度在T75培养皿中培养细胞。将板在37℃、5％CO2下在加湿培养箱中静置孵育。

3小时后，更换培养基，换成10 ml新鲜的完全培养基，除去积聚在培养皿表面上的非粘附细胞。

再培养8小时后，用10 ml新鲜的完全培养基更换培养基。此后，每8小时重复该步骤，直至完成72小时的初始培养。

细胞可以2 × 106个细胞/小管的密度混入MSC生长培养基及10％ DMSO（D2650）中冷冻。

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