什(shen)么是转(zhuan)染(ran)及常用转(zhuan)染(ran)方法
转染是将核酸导入真核细胞(bao)的(de)过程。细胞(bao)既可(ke)(ke)通(tong)过稳定转染将DNA整合(he)到其基(ji)因组中,也可(ke)(ke)通(tong)过瞬(shun)时转染以进行蛋白的(de)暂时表(biao)达(da)。细胞(bao)转染结(jie)合(he)化学(xue)、物(wu)理(li)和生(sheng)(sheng)物(wu)学(xue)三种(zhong)方法来研究细胞(bao)环境中的(de)基(ji)因功能和表(biao)达(da)。其应用包括(kuo)基(ji)因治(zhi)疗(liao)、诱导多能干细胞(bao)(iPSC)的(de)产(chan)生(sheng)(sheng)、基(ji)于RNA干扰(rao)(RNAi)的(de)基(ji)因沉默以及治(zhi)疗(liao)性抗(kang)体和蛋白质(zhi)的(de)生(sheng)(sheng)产(chan)。
常用(yong)转染方法(fa)
脂质和(he)脂质体:阳离子脂质可形成包含DNA或RNA的脂质体以进行传递。这些脂质体可与细胞膜发生融合并将核酸释放进细胞中。
磷(lin)酸钙:磷酸钙可促进DNA与细胞表面的结合,使遗传物质通过内吞作用进入细胞。
阳离子(zi)聚合物(wu):在基于聚合物的转染中,外源DNA可与阳离子聚合物,如聚乙烯亚胺(PEI)形成复合物,并通过内吞作用进入宿主细胞。
慢病毒转导(dao):细胞会感染被修饰的慢病毒载体,而慢病毒载体会将其病毒RNA转化为双链DNA,进而整合到宿主基因组中进行传递。
微注(zhu)射:首先把目标细胞置于显微镜下,然后使用细玻璃毛细管针将核酸直接注入细胞质或细胞核中。
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